ELISA实验时所要注意的一些问题

1.要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。最好有专业人员进行矫正。

    2.要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。

    3.要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。

    4.实验时，要使底物避光保存。

    5.用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。

    6.吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

    7.将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。

    8.液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

    9.温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。

    10.洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加ce di。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

    11.洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

    12.底物是光敏感的，要在临用前现配。

    13.检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。

    14.底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。

    15.待检样品要澄清，否则会影响结果。

    16.温浴时间应遵守试剂盒规定。

    17.应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。

    18.对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。